Úsáidtear teicneolaíocht phacáistithe PCR (imoibriú slabhrúil polaiméaráise) go forleathan i mbitheolaíocht mhóilíneach. Is é an croíphrionsabal atá aige ná aimpliú agus cosaint éifeachtach blúirí DNA a bhaint amach trí phróiseas pacáistithe ar leith. Is í an eochair don teicneolaíocht seo ná a prionsabal oibre beacht, a chinntíonn cruinneas agus iontaofacht thurgnamhach.
Tá an prionsabal pacáistithe PCR bunaithe go príomha ar rialú rothaíochta teochta. Le linn imoibriú PCR, cuirtear an córas imoibriúcháin PCR ina bhfuil an blúire DNA atá le méadú, primers, polaiméaráise DNA, agus DNTPS i bhfeadán PCR nó microplate atá deartha go speisialta. Ní mór na soithí imoibriúcháin seo a bheith séalaithe go maith chun galú imoibrí a chosc agus an t -ábhar salaithe seachtrach a chur isteach le linn an imoibrithe.
Ansin téann an ionstraim PCR trí thrí phríomhchéim ag baint úsáide as teochtaí a rialaítear go beacht: dínádúrú, ionsú, agus síneadh. Le linn na céime dínádachta, scaoileann teochtaí arda (94 {-} 98 de ghnáth) an DNA dúbailte - i snáitheanna aonair. Le linn na céime annealing, laghdaítear an teocht (céim 50-65 de ghnáth) chun ligean do phríomhairí ceangal le seichimh chomhlántacha ar an DNA aon-shnáithe. Le linn na céime síneadh, ardaítear an teocht arís go dtí thart ar 72 céim, rud a ligeann do pholaiméar DNA snáitheanna DNA nua a shintéisiú faoi threoir na bpríomhairí.
Ní hamháin go gcosnaíonn pacáistiú PCR an córas imoibriúcháin ó chur isteach seachtrach ach freisin, trína airíonna ábhartha, coinníonn sé cobhsaíocht teochta imoibriúcháin, ag cinntiú rothaíocht bheacht teochta. Ina theannta sin, cuireann ard - ábhair phacáistithe PCR ar ardchaighdeán cosc ar ghalú uisce, ag cothabháil toirt imoibriúcháin tairiseach, agus dá bhrí sin a chinntiú go mbeidh frithghníomhartha éifeachtúla PCR.
Go hachomair, oibríonn pacáistiú PCR trí thimpeallacht chobhsaí agus iontaofa a sholáthar le haghaidh aimpliú DNA trí rialú beacht teochta agus ardábhair phacáistithe ardchaighdeáin -. Is teicneolaíocht riachtanach í do thaighde nua -aimseartha bitheolaíochta móilíneach.